BI细胞消化试剂—轻柔对待您的细胞

来源: 上海逍鹏生物科技有限公司   2019-10-12   访问量:1050评论(0)

老子说:治大国如烹小鲜。

网友说:待细胞如养熊猫。

细胞的生命极其脆弱
消化一定程度上是对它们的一种折磨

所以做好细胞消化,善待你的细胞们


一些细节要注意

 

在使用胰酶(Trypsins)细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。

胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差,做流式时的CD Marker 也可能会下降。

 

细胞消化心得

 

对大部分细胞消化来说,可以在消化到差不多快要脱落的时候,移除大部分胰酶,然后直接加新鲜的培养基将细胞吹打下来,省去离心步骤。残余的胰酶含量很低,所以不会对细胞产生任何影响。


对于难消化的细胞如HCT15, LS411和KM12,用不含Ca2+,Mg2+的PBS洗涤一次后,加入稍微多一点胰酶,置37ºC彻底消化(一般为几分钟)至脱落(一晃细胞就掉下来),然后再加培养基终止胰酶反应、离心 (若是无血清培养基,需改加胰酶抑制剂)。这么做的道理是,细胞消化不彻底,势必会增加吹打辅助脱落的次数,而吹打次数越多,细胞活性越差。

 

正确选择细胞消化试剂

 

BI提供动物来源的传统胰酶及基因工程生产的重组胰蛋白酶。


动物胰酶普遍用于血清培养,不同的细胞加入胰酶的成分和浓度不一样。贴壁不牢和半贴壁细胞尽量使用浓度0.05%不含EDTA的胰酶且不需要放在培养箱孵育,这样易于控制,对细胞的伤害也降到最低。对于难消化的细胞就需要使用含EDTA的0.25%的胰酶,而不是无限的延长消化时间。


EDTA有什么作用呢?许多人不用胰酶,只用EDTA,或者用胰酶/EDTA联合作用。胰酶切割ECM负责粘连和附着的蛋白,而EDTA通过螯合Ca2+,抑制Integrin的贴壁活性,所以EDTA的作用更加温和。


重组胰酶用于无血清培养。重组胰酶具有与动物源性胰蛋白酶相同的酶学性质,但是不含任何动物源成分,可替代胰蛋白酶使用。


BI生产的重组胰酶Recombinant Trypsin EDTA Solution ,堪称传统胰酶的完美替代者。无杂酶,无外源性或内源性病毒污染,无PMSF、EDTA等任何蛋白酶抑制剂,较传统的胰酶使用方便,在细胞培养实验中减少了很多不必要的操作,细胞培养效果大大提高了。

 

BI Trypsin EDTA Solution A

 

BI Recombinant TrypsinEDTA Solution

 

 

表格为BI提供的细胞消化相关产品信息,可供选择参考


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