生物在线 - 让科研更便捷 ：生命科学专业网，试剂，仪器，抗体，耗材在线查询
#全球疫情速览#据Worldometer实时统计数据显示，截至北京时间5月16日6时全球累计确诊新冠肺炎病例超5.2亿，全球单日新增确诊病例约48万例。美国约翰斯·霍普金斯大学最近发布的统计数据显示，截至美国东部时间17日，美国累计新冠死亡病例超过100万例，累计确诊82680909例。世界卫生组织5月5日公布的一份评估报告显示，2020年1月1日至2021年12月31日期间，新冠肺炎疫情导致的“超额死亡”人数约为1490万人。大流行风险依然严峻，美欧多国新冠病例再度攀升，全球主流毒株奥密克戎还在不断变异，造成南非等国病例激增。欧盟委员会委员表示，“新冠疫情只是进入新阶段，远非结束。”*“超额死亡”，指全球实际发生的死亡人数与基于大流行未发生年份估算得到的正常死亡人数之间的差额，是了解大流行影响的重要衡量标准。重组毒株接连涌现2022年3月，新冠病毒重组毒株"Deltacron"（XD）被证实的消息出现在各大新闻。世卫组织认为，新冠病毒进化以及出现包括重组毒株在内的新变异毒株的风险依然很高。而事实也证明确实如此，自XD被发现以来，XE、XL等各种重组株如雨后春笋般出现。截至目前，公共数据库Pangolin已收录从XA到XW共23种重组株。研究人员也表示，重组变体其实并不罕见，当机体同时感染2种或2种以上的新冠变种时，就可能产生重组变体。但绝大多数的重组变体会很快消亡，留存下来的，一般都是具有毒力和传播优势的毒株。Omicron重组毒株概述由于大部分重组株的断裂位点位于ORF区，不影响病毒Spike和Nucleocapsid等结构蛋白区域，故而此类病毒株的结构蛋白和重组来源的毒株完全一致，一般不会对病毒的识别和抗体结合产生影响。然而，由于ORF区的NSP蛋白在病毒感染过程中发挥功能，该位置的重组可能影响病毒的传播能力。Omicron仍在不断变异新冠病毒Omicron变种自2021年底出现以来以惊人的速度传播和变异，第一代OmicronB.1.1.529（BA.1）在短短几周内就在全球多个国家取代Delta占据主导地位，随后又被下一个子变种BA.1.1所取代。2022年3月，BA.2亚型开始在亚洲和欧洲的部分地区迅速传播并被认为相比于BA.1具有更强的传染性且对现有单克隆抗体治疗发生逃逸。同一时间还有另一个Omicron亚型BA.3在南非被检测到，但并未在世界范围内造成过多的感染病例。相关阅读：细说Omicron亚型：BA.1、BA.1.1、BA.2、BA.32022年4月，又一新Omicron亚型BA.2.12.1感染病例数在全美范围内呈爆炸性增长。美国疾控中心估计，截至5月初，BA.2.12.1病例占全美国感染人数的43%，远高于2月初出现在美国疾控中心的变体跟踪系统上0.2%的感染比例。对新变异特征的研究也表明BA.2.12.1可能具有更强的传染性，比先前占主导地位的BA.2具有大约23%~27%的传播优势。另一个BA.2子谱系BA.2.13在比利时、德国、丹麦等欧洲国家传播，造成约700人感染。BA.2.12.1在美国传播情况自新冠病毒爆发以来，南非地区接连爆发新突变。继第二波Beta、第三波Delta、第四波Omicron之后，南非或将迎来第五轮疫情高峰。世界卫生组织于11日表示，2022年1月开始爆发于南非的Omicron病毒亚型变异株BA.4和BA.5已分别扩散至十多个国家。截至今日，BA.4病毒已蔓延至少16个国家，累计病例超过1800起，BA.5则在至少17个国家被检出，累计1300逾病例。北京大学谢晓亮团队于5月2日在bioRxiv发表了预印文章，对目前已发现的BA.2.12.1、BA.2.13、BA.4和BA.5突变株进行了研究。结果表明，上述新发现变异毒株都包含L452突变，并显示出比BA.2更高的潜在传播能力。与BA.1和BA.3相比，BA.2亚谱系中因缺乏G496S突变增加了它们与ACE2受体的结合能力；而F486V的引入和Q493R的缺失则可能导致疏水和亲水相互作用减少，从而使得BA.4和BA.5的结合活性显著降低。Omicron各谱系突变位点情况此外，与BA.2相比，BA.2.12.1和BA.4/BA.5对接种3剂疫苗接种者的血浆表现出更强的中和逃避。通过进一步对逃避突变谱进行分析发现，L452突变出现在Omicron康复者诱导的免疫压力下。 ACROBiosystems紧密关注新冠疫情发展，第一时间研究开发了BA.2.12.1、BA.2.13、BA.4、BA.5等系列抗原蛋白，并开发有L452Q、L452M、L452R等热门突变，致力于加速针对相关变异毒株及现有疫苗、治疗性抗体及诊断试剂对其效果的研究，并在必要时迅速展开针对性新型疫苗及抗病毒药物研发。产品优势覆盖BA.1、BA.1.1、BA.2、BA.3、BA.2.12.1new、BA.2.13new、BA.4new、BA.5new等主要亚型；根据研究热点，特别开发有L452Q、L452M、L452R&F486V等热点突变；包括SpikeTrimer、RBD、NTD、S1、N蛋白等主要抗原分子；提供生物素化及非生物素化版本抗原蛋白，满足不同实验需求；纯度经SDS-PAGE验证大于95%；经MALS验证大于90%；严格质控，活性保证，适用于ELISA/SPR/BLI等实验。产品列表点击图片查看产品详细信息>点击查看更多新冠Omicron突变抗原（BA.1/BA.2/BA.3）>点击查看更多新冠研究核心研发工具（抗原、抗体、假病毒、ELISA试剂盒、磁珠）验证数据 经SDS-PAGE验证，BA.2.12.1Spike Trimer (Cat. No. SPN-C522d)纯度>95%，经MALS验证三聚体纯度90%。Thepurity of SARS-CoV-2 Spike Trimer, His Tag (BA.2.12.1/Omicron) (Cat.No. SPN-C522d)is more than 95%verifiedby SDS-PAGE and 90% verified by SEC-MALS. The molecular weight ofthis protein is around 510-560 kDa. 经ELISA验证，BA.2.12.1Spike Trimer (Cat. No. SPN-C522d)与广谱抗体(Cat.No. S1N-M122)及Omicron特异性抗体(Cat.No.SPD-M305)均能发生结合，线性范围分别为0.1-4ng/mL；1-31ng/mL。Immobilized SARS-CoV-2 Spike Trimer, His Tag (BA.2.12.1/Omicron) (Cat. No.SPN-C522d)at 1 μg/mL (100 μL/well) can bind Anti-SARS-CoV-2 Spike RBDAntibody, Chimeric mAb, Human IgG1 (Cat. No.S1N-M122)with a linear range of 0.1-4 ng/mL (Routinely tested).ImmobilizedSARS-CoV-2 Spike Trimer, His Tag (BA.2.12.1/Omicron) (Cat. No.SPN-C522d)at 1 μg/mL (100 μL/well) can bind Anti-SARS-CoV-2 Spike RBDAntibody, Mouse IgG1 (Omicron Specific) (Cat. No. SPD-M305)with a linear range of 1-31 ng/mL (Routinely tested). 参考文献：1.Chen, C. et al. CoV-Spectrum: analysis of globally shared SARS-CoV-2 data to identify and characterize new variants. Bioinformatics 38, 1735–1737, doi:10.1093/bioinformatics/btab856 (2021)2.Yunlong Cao, Ayijiang Yisimayi, Fanchong Jian, et al. BA.2.12.1, BA.4 and BA.5 escape antibodies elicited by Omicron infection. bioRxiv 2022.04.30.489997; https://doi.org/10.1101/2022.04.30.489997 ACROBiosystemsinquiry@acrobiosystems.com15117918562（备注：姓名+公司） ...
靶向TREM2的药物研发进展 髓系细胞触发受体-2 (TREM2，triggering receptor expressed on myeloid cells-2)是一种主要表达于中枢神经系统小胶质细胞的细胞表面受体，在调节小胶质细胞能量代谢和表型转化中起重要作用。目前，TREM2已被开发为阿尔茨海默症（AD）、实体瘤等疾病的潜在靶点。靶向TREM2的生物药研发进展（药渡数据）在肿瘤研究领域，最近的研究表明，通过抗TREM2抗体重构肿瘤相关巨噬细胞是一种很有前途的方法。检查点免疫治疗可以释放T细胞控制肿瘤，但会被免疫抑制的髓系细胞破坏。抗TREM2单克隆抗体联合抗PD-1治疗可抑制肿瘤细胞生长，促进肿瘤回归；小鼠实验证实，阻断TREM2蛋白可增强PD-1抗体的作用，使小鼠肿瘤完全消失。TREM2的分布和信号通路TREM2是在髓系细胞中表达的单向跨膜免疫反应受体，在中枢神经系统中主要由小胶质细胞表达，其表达水平是神经元或其他细胞的300倍，而且主要位于细胞内的高尔基体；外周主要表达部位为巨噬细胞、未成熟树突状细胞和破骨细胞。TREM2有多种配体，主要是与质膜结合的游离负电荷分子，包括细菌产物，DNA，脂蛋白和磷脂。研究表明载脂蛋白E (APOE)是一个与TREM2高度亲和的新配体。APOE模拟肽激活TREM2可缓解脑出血后神经元凋亡。当TREM2作为膜受体与配体脂质结合时，可通过接头蛋白DAP12传递胞内信号。DAP12含有单一的免疫受体酪氨酸激活基序(ITAM)，能够招募脾脏酪氨酸激酶(SYK)，从而触发一系列酪氨酸磷酸化事件，进而激活下游介质，如磷脂酶Cγ2 (PLCγ2)，磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)，哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)，最终导致细胞活化。TREM2与配体结合，介导广泛而复杂的生理作用 TREM2在AD病理中的重要作用AD是痴呆的首位病因，约占所有痴呆类型的60%-80%。主要分为两类，家族遗传倾向型，占极少部分（＜1%），发病年龄30-60岁；晚发型AD，占大部分（＞99%），普遍发生在65岁以后。根据World Alzheimer Report的统计数据，2015年全球AD患者人数就有4680万，全球新增患者990万人，这意味着平均每 3 秒钟就有一例新增病例，预计2030年增长至7470万，到2050年时，这个数字将会达到1.3 亿。TREM2基因突变体R47H同APOE基因一样，是晚发性AD的高风险因子。该突变体导致缺乏功能的截短TREM2蛋白表达，从而导致对Aβ清除能力降低。TREM2在AD的Aβ和Tau蛋白病理过程中起重要作用。AD模型小鼠的单细胞RNA测序显示“disease-associate microglia”（DAM）和“microglial neurodegenerative phenotype”（MGnD）两者的特点表现为TREM2激活和APOE高水平表达。小胶质细胞通过TREM2与Aβ结合，并限制磷酸化Tau病理范围。TREM2功能丧失导致Aβ淀粉斑处小胶质细胞数量减少，Aβ沉积量的增加。此外，TREM2的缺失也会促进Aβ存在下病理Tau的累积。TREM2调控小胶质细胞参与Aβ病理过程TREM2参与脑卒中小胶质细胞表型转化脑卒中是全球第二大死亡原因，是由大脑供血动脉(颈动脉和椎动脉)狭窄或闭塞和大脑供血不足引起的脑坏死。脑卒中主要分为出血性脑卒中和缺血性脑卒中，其中缺血性约占80%-85%，出血性约占15 - 20%。研究表明，脑缺血会导致细胞坏死，还会产生活性氧（ROS）并释放炎症介质，如细胞因子和趋化因子，从而导致小胶质细胞的活化，引起神经炎症、脑水肿、加重血脑屏障(BBB)损伤，导致更多的神经元死亡。神经炎症的加重被认为是缺血性脑卒中的致命发病机制，中枢神经系统对神经炎症的免疫调节是一种可行的替代治疗方法。小胶质细胞是脑卒中后最早激活、持续时间最长的免疫细胞，参与了脑卒中后几乎所有的病理反应。近日，广州中医药大学和协和医院团队总结了TREM2在卒中后小胶质细胞的功能变化，并发现TREM2对能量代谢有重要影响，负责介导脑卒中后小胶质细胞吞噬作用和抗炎功能，表明TREM2是一个潜在的治疗脑卒中的靶点。根据小胶质细胞的胞外环境，小胶质细胞分化为两种不同的表型，经典激活表型M1和替代激活表型M2。M1释放炎症介质，如IL-1β，TNF-α， NO和ROS，可清除潜在病原体。然而，小胶质细胞持续过度激活的结果是产生过多的促炎介质，从而创造一个细胞毒性环境，最终可能导致神经元丢失和认知功能下降；M2小胶质细胞促进组织修复和细胞外基质重建，释放抗炎细胞因子，维持体内环境平衡，因此，M2表型由于其吞噬活性和抗炎作用被认为具有神经保护作用。研究表明，TREM2参与了缺血性脑卒中小胶质细胞M1向M2的表型转化及小胶质细胞介导的神经炎的调控。脑卒中过程中涉及小胶质细胞的激活，以及TREM2的结构和功能改变，包括抗炎、调节细胞生存、促进代谢、改善吞噬功能等。在大脑中动脉闭塞(MCAO)小鼠模型中，TREM2促进小胶质细胞从促炎M1表型向抗炎M2表型转化。全身注射TREM2激动剂或TREM2慢病毒直接进入脑室可增强小鼠的神经保护作用，提示TREM2可调节脑卒中小胶质细胞的表型，并可能影响脑卒中小鼠的短期预后。脑卒中后小胶质细胞表型转化对TREM2表达的影响 小结TREM2作为一种新的小胶质细胞表型调控因子，在AD的Aβ和Tau蛋白病理过程起到重要作用，是治疗AD的一个有潜力的靶点。此外，TREM2在缺血性脑卒中中可能存在具有潜在意义，越来越多的证据证明TREM2通过减轻实验性缺血性脑卒中的神经炎症，具有较强的神经保护作用，TREM2为小胶质细胞调控缺血性脑卒中提供了一个有吸引力的靶点，有望成为潜在治疗策略。当然，TREM2在缺血性脑卒中中的表达及其作用机制的时间动力学仍需进一步研究。 ACROBiosystems已开发TREM2系列蛋白，生物活性经anti-TREM2抗体及APOE结合验证，欢迎咨询订购~ 验证数据☞TREM2与anti-TREM2抗体结合经ELISA验证， Human TREM2, His, Tag (Cat. No. TR2-H52H5) 可以与Anti-TREM2 Antibody, Human IgG1特异性结合，线性区间为0.3-2 ng/mL (QC检测)。申请Protocol☞TREM2与APOE抗体结合经BLI检测， 转载在Protein A 生物传感器上的Human TREM2, Fc Tag (Cat. No. TR2-H5254) 可以特异性结合Human Apolipoprotein E, His Tag (Cat. No. APE-H5246)，亲和力常数为 106 nM (ForteBio Octet Red96e)。申请Protocol 推荐往期阅读：【靶点新势力】TREM2在AD、肥胖症、癌症治疗潜力不容小觑点击了解Aneuro——脑与神经蛋白 ACROBiosystemsinquiry@acrobiosystems.com15117918562（备注：姓名+公司） 参考文献：1. Paasila PJ, Aramideh JA, Sutherland GT, Graeber MB. Synapses, Microglia, and Lipids in Alzheimer's Disease. Front Neurosci. (2022), https://doi.org/10.3389/fnins.2021.778822.2. Shi Y, Holtzman DM. Interplay between innate immunity and Alzheimer disease: APOE and TREM2 in the spotlight. Nat Rev Immunol. (2018). https://doi.org/10.1038/s41577-018-0051-13. Wen-yu Ma， Sha-sha Wang， Qing-lin Wu， Xin Zhou， Shi-feng Chu， Nai-hong Chen， The versatile role of TREM2 in regulating of microglia fate in the ischemic stroke， International Immunopharmacology（2022）， https://doi.org/10.1016/j.intimp.2022.108733....
低密度脂蛋白胆固醇（Low-density lipoprotein cholesterol, LDL-C）的升高是导致高血脂的“元凶”之一， 它的含量可以反映血浆中运输内源性胆固醇的主要载体——低密度脂蛋白(Low Density Lipoprotein, LDL)的水平。肝细胞表面的低密度脂蛋白受体（LDLR）可以与LDL结合形成 LDL-R-LDL 复合物从而降解LDL-C，之后 LDLR 再循环回到细胞表面。PCSK9是LDL-C找的一个“帮手”前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin9型（PCSK9）是一种参与LDLR生命周期的分泌性蛋白，通过促进LDLR降解来调节血浆LDL-C 水平。PCSK9 是LDLR的主要下调因子：PCSK9 与 LDLR 的胞外结构域结合产生了一种复合物，该复合物易位至内体，其中酸性 pH 增强了 PCSK9 与 LDLR 的结合亲和力，使LDLR在溶酶体中的降解增强，防止 LDLR 再循环到细胞膜，进而引起循环LDL-C水平增高。Figure.1：ScienceDirect靶向PCSK9的研发策略目前，越来越多的企业看好PCSK9靶向药市场，并开发出多款在研药物。以单抗为主，此外还包括小分子药物、siRNA反义寡核苷酸疗法、环肽类药物药物和抑制循环 PCSK9 活性的 PCSK9 疫苗等，基因编辑技术直接修改 PCSK9 基因以实现一劳永逸的预防心血管疾病也在进一步研究当中。Figure.2 A: Strategiestargeting PCSK9. PCSK9 activity can be inhibited at several levels. B: PCSK9 function and potential targets forinhibition.单克隆抗体2015年7月、8月，FDA分别批准了赛诺菲／再生元联合开发的Alirocumab（阿利西尤单抗）以及安进开发的Evolocumab（依洛尤单抗）两款单抗类产品，可阻断循环PCSK9蛋白和LDLR之间的相互作用。Lerodalcibep一种由Lib Therapeutics公司开发的含PCSK9结合域和人血清白蛋白的重组融合蛋白，可将其半衰期延长至12-15天，目前正处于Ⅲ期临床试验阶段，显示出了较好的疗效。由于作用机制明确，PCSK9单抗也成为国内药企追捧的领域。Tafolecimab是信达生物自主研发的一种用于治疗高胆固醇血症的抗PCSK9重组全人源单克隆抗体，临床研究结果显示：该药具有良好的安全性、耐受性及疗效，所有接受Tafolecimab给药的健康受试者和高胆固醇血症受试者中LDL-C均发生降低，而且展现了更长时间的给药间隔。昂戈瑞西单抗（JS002）是君实生物开发的一款重组人源化抗PCSK9单抗，拟开发用于治疗原发性高胆固醇血症和混合型高脂血症。已完成的I期和II期临床研究结果显示：该药良好的安全性和耐受性特征，而且降脂疗效显著。小分子抑制剂尽管破坏 PCSK9-LDLR 结合的治疗性抗体/抑制剂可降低 LDL-C 浓度和心血管疾病风险是目前基于PCSK9靶点的主流开发策略。但是，LDLR 的表皮生长因子前体同源结构域 A (EGF-A) 通过平面界面与 PCSK9主要接触对识别小分子 PCSK9-LDLR 干扰物的筛选提出了挑战。诺华公司创新开发基于亲和力筛选方案，基于Peptide Discovery Platform System (PDPS) 技术平台，研究人员使用生物素化PCSK9 蛋白偶联磁珠，对大环肽分子进行筛选：从包含 > 1013 个独特肽的初始库中，链霉亲和素磁珠富集了 PCSK9 特异性结合剂，最终通过多次复筛并配合二代测序技术发现小分子抑制剂13PCSK9i；进一小鼠动物模型验证发现随13PCSK9i剂量增加，降低血浆胆固醇水平并增加肝脏 LDLR 密度。13PCSK9i 通过独特的变构机制发挥作用，是迄今为止鉴定的具有体内 PCSK9-LDLR 阻断功能的最小分子，其分子量约为常规抗体的1/100此外，通过对初始文库筛选，发现特异性PCSK9识别高亲和力配体。这些配体利用独特的诱导贴合口袋并部分破坏 PCSK9-LDLR 相互作用。基于此结构的设计的分子具有增强的功能和药代动力学特性。这一系列研究成果为动脉粥样硬化新类型小分子抑制剂开发提供新的开发方向 [2]。Figure. 3 13PCSK9i functions by a distinct, allosteric mechanism and is the smallest molecule identified to date with in vivo PCSK9-LDLR disruptor function.小干扰RNA（siRNA）Inclisiran是一种由阿斯利康开发的靶向PCSK9的双链小干扰RNA（siRNA），其可以通过特异性地降解PCSK9 mRNA来抑制翻译，减少PCSK9蛋白的合成，从而降低血浆LDL-C水平。研究显示，Inclisiran可使血浆中LDL-C水平降低50%，且拥有半年一次给药潜力，是当之无愧的明星药。该药目前已获得欧洲药品管理局和美国FDA的批准。反义寡核苷酸疗法（ASO）AZD8233是阿斯利康和Ionis合作而获得的一款PCSK9靶向反义寡核苷酸（ASO）药物，用于靶向抑制肝细胞内PCSK9 mRNA的翻译和蛋白合成。I期临床试验结果显示，单剂AZD8233皮下注射可实现PCSK9水平降低超 90％，LDL-C 水平降低 70％。2021年12 月 16 日， AZD8233 首次在国内递交临床申请。环肽类药物MK-0616是一种可通过消化道吸收的合成的小分子环状肽类，能阻断PCSK9蛋白和LDLR的结合。临床试验结果显示：MK-0616在高胆固醇患者中的耐受性良好，剂量达300毫克，没有死亡或严重副作用。在一项多剂量研究中，在当前他汀类药物治疗的基础上服用MK-0616的患者，LDL-C比基线水平降低了约65%。基因编辑技术CRISPR单碱基编辑技术是一种正处在动物实验阶段的降脂疗法。研究显示，在非人类灵长类动物中，单次输注被PCSK9信使RNA包围的脂质纳米颗粒，可有效降低PCSK9蛋白和LDL-C水平，且只有低水平的脱靶编辑。更多替代治疗（如锌指核酸酶、CRISPR-Cas9核酸酶）的研究正在进行中，还需要进一步评估脱靶编辑水平和长期安全性。>>>点击了解：CRISPR-Cas系列蛋白总结：PCSK9越来越受到各药企的青睐，随着研究的深入，除了降血脂，PCSK9靶向药还有望用于治疗糖尿病、非酒精性脂肪肝等代谢性疾病，以及与代谢密切相关的疾病如阿尔兹海默病、肿瘤等。 ACROBiosystems开发了一系列PCSK9相关蛋白用于动脉粥样硬化等相关研究。产品特征产品覆盖多种属、多标签，覆盖D374Y、R194A等突变位点高纯度：经SDS-PAGE验证纯度＞95%；经SEC-MALS验证纯度＞90%高生物活性：经ELISA/SPR/BLI/FACS验证，免费提供 Protocol生物素化的产品可以满足抗体/小分子抑制剂创新筛选应用方案需求多样化产品选择—PCSK9抑制剂筛选试剂盒除了重组蛋白相关以外，ACROBiosystems 基于其独特的生物素标记蛋白产品，开发了PCSK9抑制剂筛选试剂盒（PCSK9 [Biotinylated] : LDL R Inhibitor Screening ELISA Assay Pair），用于对Human PCSK9 与human LDL R 结合的抑制剂进行快速高通量筛选。产品列表验证数据>>>均一结构及纯度经MALS验证The purity of Human PCSK9, His Tag (Cat. No. PC9-H5223) is more than 90% and the molecular weight of this protein is around 70-80 kDa verified by SEC-MALS.>>>高生物活性经ELISA验证Immobilized Human PCSK9, His Tag (Cat. No. PC9-H5223) at 2 μg/mL (100 μL/well) on an Nickel Coated plate can bind Human PCSK9 Mab (RN316), Human IgG1 with a linear range of 0.2-3 ng/mL (Routinely tested).Immobilized Human LDL R, His Tag (Cat. No. LDR-H5224) at 10 μg/mL (100 μL/well) can bind Biotinylated Human PCSK9, Avitag,His Tag (Cat. No. PC9-H82E7) with a linear range of 8-63 ng/mL (QC tested).Protocol>>>高生物活性经BLI验证Loaded Human LDL R, Fc Tag (Cat. No. LDR-H5254) on Protein A Biosensor, can bind Cynomolgus PCSK9, His Tag (Cat. No. PC9-C5223) with an affinity constant of 1.46 nM as determined in BLI assay (ForteBio Octet Red96e) (Routinely tested).Protocol>>>高生物活性经FACS验证FACS analysis shows that the effect of Human PCSK9 (D374Y), His Tag (Cat. No. PCY-H5225) inhibiting LDL uptake in HepG2 cells was neutralized by Anti-Human PCSK9 antibody. The concentration of PCSK9 used is 5 μg/mL. The EC50 for Anti-Human.Protocol★PCSK9 [Biotinylated] : LDL R抑制剂筛选试剂盒（货号：EP-103）PCSK9 [BIOTINYLATED]: LDL R BINDING IN THE ABSENCE OF INHIBITORSImmobilized human LDL R protein at 3 μg/mL (100 μL/well) can bind biotinylated human PCSK9 with a linear range of 0.000625-0.02 μg/mL when detected by Streptavidin-HRP. Background was subtracted from data points before curve fitting (QC tested).ProtocolINHIBITION OF PCSK9 [BIOTINYLATED]: LDL R BINDING BY ANTI-PCSK9 NEUTRALIZING ANTIBODYSerial dilutions of anti-PCSK9 neutralizing antibody (Catalog # PC9-NA003) (1:2 serial dilutions, from 20 μg/mL to 0.04 μg/mL or 133.33 nM to 0.26 nM) were added into Biotinylated PCSK9: LDL R binding reactions. Background was subtracted from data points prior to log transformation and curve fitting (QC tested).Protocol 热门评论★★★★★ PC9-H82E7: Biotinylated Human PCSK9 Protein, Avitag™,His Tag (MALS verified)，我们主要使用此抗原来进行ELISA实验，在方法开发阶段使用FC标签的pcsk9包被无果后，购买了此款生物素标记的pcsk9抗原，在提前包被SA后，再进行此抗原包被，成功完成本实验，解决了我们实验过程中包被抗原的难题。 这个应用场景的设计是不是让各位老师眼前一亮呢？原来还可以借助生物素-链霉亲和素系统的强结合能力来解决问题！不过，自己铺板的时候也要注意手法哦，否则也会有铺板不均匀的情况存在。作为您实验路上值得信赖的伙伴，ACROBiosystems也推荐您使用我们的链霉亲和素预包被96孔板（Cat.No. SP-11），利用生物素-链霉亲和素系统的高特异性和高灵敏度特性，可将生物素化蛋白固定在链霉亲和素包被96孔板上以应用于各类实验，避免自己包被铺板不均一的问题，且与非生物素体系相比检测速度更快、结合能力更强、非特异背景更低。 ACROBiosystemsinquiry@acrobiosystems.com15117918562（备注：姓名+公司） 参考文献：1. Seidah NG, Prat A, Pirillo A, Catapano AL, Norata GD. Novel strategies to target proprotein convertase subtilisin kexin 9: beyond monoclonal antibodies. Cardiovasc Res. 2019;115(3):510-8.2. Ben-Naim L, Khalaila I, Papo N. Modifying pH-sensitive PCSK9/LDLR interactions as a strategy to enhance hepatic cell uptake of low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C). Protein Eng Des Sel. 2022;35.3. Brousseau ME, Clairmont KB, Spraggon G, Flyer AN, Golosov AA, Grosche P, et al. Identification of a PCSK9-LDLR disruptor peptide with in vivo function. Cell Chem Biol. 2022;29(2):249-58 e5. ...
扫二维码，用手机看生物在线
关注生物谷
关注生物在线
需要在生物谷或旗下网站投放广告，或成为特约赞助商，请联系我们 电话：17321017529，邮箱：business@bioon.com
Copyright ® 2020 Bioon.com.cn 版权所有 不得转载. 著作权声明 | 法律声明
互联网药品信息服务资格证书：（沪）-非经营性-2015-0113 | 沪ICP备14018915号-4
沪公网安备 31010402000323号
Copyright ® 2020 Bioon.com.cn 版权所有 不得转载.
